九月十六日，有关第二届江苏省足球发展重点城市对抗赛的规则文件公布出来。十一月下旬的时候，南京和苏州会各自组织队伍，去争夺比赛的最高名次。
依照规定，此次竞技活动由江苏省体育管理部门负责组织，同时由南京市体育管理部门、苏州市体育管理部门、江苏省足球运动组织以及江苏省体育事业公司共同执行。比赛实行主客场制，第一场较量安排在11月22日晚上19点35分，在南京奥体中心运动场开展，第二场交锋则定于11月29日晚上19点35分，转换到苏州奥体中心运动场进行。
参赛资格方面，规则对运动员和裁判员都有具体规定。运动员必须是在1985年1月1日到2009年12月31日期间出生的，并且要符合户籍所在地、社会保险缴纳地、学校注册地或身份证登记地等至少一项与参赛城市挂钩的要求，此外每场比赛里，2003年1月1日之后出生的运动员出场数量不能少于五个，这体现了比赛对年轻运动员成长的关注。官方人士方面，教练员必须拥有亚足联或中国足协签发的B级以上有效执教资格，助理教练则要求持有C级以上相关证明，队内医务人员须具备合法行医资质，领队职位由市级体育管理部门指定负责人担任。
赛事遵循国际足球理事会最新颁布的《足球竞赛规则》执行,比赛总共进行90分钟,分为两个45分钟的半场,中间休息时间不超过15分钟,每支球队每场比赛可以更换最多7名队员,并且可以实施3次换人,中场休息时还可以额外进行一次换人,两回合比赛的胜负取决于进球数,进球多的队伍获胜,如果双方进球数相同,那么客场进球多的队伍晋级,如果客场进球数依然相同,则需要通过点球大战来决定胜负另外，如果运动员或者裁判在比赛里收集到两张黄卡，又或者得到一张红卡，那么他们就必须被禁止参加下一场比赛。
在奖励安排上，第一名队伍会得到冠军奖杯、资金支持和金牌，第二名队伍则被授予银牌；个人荣誉有最佳球员、最佳进球者和最佳门将这三个奖项，负责判罚的裁判也会得到一个纪念性的奖杯。有关赛事的技术管理人员，例如比赛监督、裁判监督和裁判等，其候选人名单由江苏省足球运动协会推荐，提交江苏省体育局批准之后才会正式公布。
本次竞赛致力于促进省内足球强市之间的互动与切磋，旨在提高地方足球运动的整体水准，各项准备工作将逐步展开，其他未尽环节会后续公布，该赛事的规则拥有最终解释权的部门是江苏省体育局。
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全国足球发展优先城市项目的推进，按照五年设定一个阶段。现阶段，已经选出十六座城市作为“十四五”时期全国足球发展优先城市，具体包括：上海市、成都市、武汉市、深圳市、广州市、长春市、重庆市、大连市、青岛市、北京市、延边朝鲜族自治州、苏州市、杭州市、梅州市、西安市、南京市。
去年十一月二十四日，江苏足球重点城市对抗赛次回合于南京奥体中心体育场进行，苏州市代表队与南京市代表队交锋，前者以一比零获胜，最终凭借两回合累计一比零的比分夺得冠军。
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